Ligação Genética

INTRODUÇÃO

Segundo o que se convencionou chamar de primeira lei de MENDEL, os pares de genes alelos se separam (ou segregam-se) durante a formação dos gametas. Ao estudar dois loci concomitantemente, MENDEL observou que a segregação dos alelos de um locus não interferia na segregação dos alelos do outro, fato este que mais tarde passou a ser chamado de segunda lei de MENDEL ou lei da segregação independente. O que será aqui apresentado demonstra que este segundo caso freqüentemente não é verdadeiro.

Inicialmente, foram cruzados indivíduos que diferiam entre si, por dois caracteres; os indivíduos da geração F1 foram cruzados entre si e a geração F2 foi então analisada. Representando dois pares quaisquer de genes por Aa e Bb, o primeiro cruzamento é feito entre dois indivíduos provenientes de linhagens "puras" e são, por isso, homozigotos; um deles apresenta o fenótipo AB e o outro, ab. Este cruzamento pode ser assim representado:

	MACHO	FÊMEA	GERAÇÃO F1
GENÓTIPOS	AABB	aabb	AaBb
FENÓTIPOS	AB	ab	AB

Todos os indivíduos pertencentes à geração F1 são duplo heterozigotos e cada um deles poderá produzir quatro tipos de gametas: AB, Ab, aB e ab. Desta maneira, se dois in-divíduos F1 forem cruzados entre si produzirão os descendentes apresentados no Quadro 1.

QUADRO 1. Genótipos possíveis na descendência de um cruzamento entre dois indivíduos duplo heterozigotos ( AaBb x AaBb).
	GAMETAS MASCULINOS
FEMININOS	AB	Ab	aB	ab
AB	AABB	AABb	AaBB	AaBb
Ab	AABb	AAbb	AaBb	Aabb
aB	AaBB	AaBb	aaBB	aaBb
ab	AaBb	Aabb	aaBb	aabb

 A análise do Quadro 1 mostra que do cruzamento entre dois duplo heterozigotos podem ser produzidos l6 tipos de descendentes. Vários deles apresentam genótipos iguais entre si e, desta maneira, são encontradas 9 classes genotípicas e apenas 4 classes fenotípicas, como demonstrado no Quadro 2.

QUADRO 2. Freqüências das classes genotípicas e fenotípicas na descendência de um cruzamento entre duplo heterozigotos (AaBb x AaB).
CLASSES  GENOTÍPICAS		CLASSES  FENOTÍPICAS
TIPO	FREQÜÊNCIAS	TIPO	FREQÜÊNCIAS
AABB	1/16
AABb	2/16	AB	9/16
AaBB	2/16
AaBb	4/16
AAbb	1/16	Ab	3/16
Aabb	2/16
aaBb	2/16	aB	3/16
aaBB	1/16
aabb	1/16	ab	1/16

Espera-se a produção de quatro classes fenotípicas na proporção 9:3:3:1, desde que os genes A e B sejam independentes entre si. Caso não o sejam, as freqüências observadas serão diferentes.

Após estudar várias características de ervilhas e observar a proporção 9:3:3:1 entre as várias classes fenotípicas em F2, MENDEL concluiu que os genes segregavam independentemente entre si (SEGUNDA LEI DE MENDEL). Entretanto, há um método de cruzamento bem mais simples,  elaborado por MORGAN, que consiste em cruzar indivíduos que diferem entre si por dois caracteres (AABB X aabb) obtendo a geração F1 (todos AaBb) da qual indivíduos são cruzados com portadores dos caracteres condicionados pelos alelos recessivos, isto é, com duplo homozigotos  recessivos (aabb).  O resultado (F2) é apresentando no Quadro 3.

Pelo Quadro 3, vê-se que os fenótipos dos indivíduos produzidos pelo cruzamento do F1 com o duplo recessivo corresponde à constituição genética dos gametas  produzidos  pelo heterozigoto.  Dessa  forma,  as  freqüências  das  classes fenotípicas obtidas nesse cruzamento correspondem às freqüências dos tipos de gametas produzidos pelo heterozigoto. Se esses dois pares de genes segregam independentemente, a freqüência de cada c;asse fenotípica é igual a 25%, ou seja, tem-se a proporção 1:1:1:1. Caso contrário, tais proporções não serão observadas.

Quadro 3: Genótipos e Fenótipos obtidos após união dos Gametas F1, com o único tipo de gametas (ab) produzindo duplo recessivo aabb.
GAMETAS F1	GAMETA PARENTAL	GENÓTIPOS F2	FENÓTIPOS F2	FREQÜÊNCIAS ESPERADAS
AB	ab	AaBb	AB	25 %
Ab	ab	Aabb	Ab	25 %
aB	ab	aaBb	aB	25 %
ab	ab	aabb	ab	25 %

 GENES LIGADOS E RECOMBINAÇÃO

Algumas drosófilas, ao invés de apresentarem olhos de cor-vermelha normal, apresentam olhos de cor marrom; outras apresentam asas anormais, com as pontas curvadas para trás. O caráter olho de cor marrom é condicionado por um gene recessivo bw e a cor vermelha normal é determinada por um gene dominante bw+. É possível, portanto, estabelecer-se uma linhagem constituída exclusivamente por moscas de olhos de cor marrom, isto é, homozigotas bw bw. Observou-se também que a asa anormal acima descrita é condicionada por um gene recessivo   arc e, portanto, pode-se também estabelecer uma linhagem em que todas as moscas apresentam asa anormal isto é, sejam homozigotas arc arc.

Isoladamente, ambos os caracteres seguem perfeitamente a primeira lei de MENDEL, isto é, o cruzamento entre um heterozigoto e um homozigoto recessivo produz descendentes com fenótipos dominantes e recessivos, na proporção de 1:1. Entretanto, não segregam independentemente entre si. Isto pode ser evidenciado com o seguinte cruzamento teste: mosca da linhagem selvagem, duplo homozigotas normais bw+arc+/bw+arc+ são cruzadas com moscas da linhagem mutante, olho marrom e asa arqueada, ou seja, duplo homozigotas recessivas bw arc/bw arc; a primeira geração (F1) é constituída exclusivamente por moscas heterozigotas com olhos e asas normais bw+arc+/bw arc. Em seguida, cruzando-se uma fêmea F1 bw+arc+/bw arc com macho de olho marrom e asa arqueada, portanto duplo recessivo   bw arc/bw arc, a fêmea deve produzir quatro tipos de gametas, a saber: bw+arc+, bw arc, bw arc+ e bw arc os quais, após a fusão com o único tipo possível de gameta bw arc produzido pelo macho duplo recessivo, produzem quatro fenótipos (Quadro 4).

No cruzamento descrito do Quadro 4, apesar de terem sido obtidas as quatro classes fenotípicas, suas freqüências foram muito diferentes das esperadas: o primeiro fenótipo apresentou uma porcentagem de 47,4%, o segundo e o terceiro, 2,6% e o último, 47,4%. Note-se que o primeiro fenótipo é semelhante ao exibido pela mãe enquanto que o último é semelhante ao do pai e, por esta razão, são chamados fenótipos parentais, enquanto que o segundo e o terceiro fenótipos representam uma "mistura" entre os fenótipos da mãe e do pai, razão pela qual são chamados de fenótipos recombinantes.

Quadro 4. Descendência de cruzamento teste entre fêmea duplo heterozigota e macho duplo homozigoto recessivo para as características cor de olho e tipo de asa em drosófila.
GAMETAS MATERNOS	GENÓTIPO DA GERAÇÃO F2	FENÓTIPOS DA GERAÇÃO F2	FREQÜÊNCIAS OBSERVADAS
bw+arc+	bw+arc+/bw arc	Selvagem (olhos e  asas normais)	47,4%
bw+arc	bw+arc/bw arc	Olho normal, asa arqueada	2,6%
bw arc+	bw arc+/bw arc	Olho marrom e asa  normal	2,6%
bw arc	bw arc/bw arc	Olho marrom-asa arqueada	47,4%

 Se ao invés de uma fêmea F1, for utilizado um macho F1 duplo heterozigoto para o cruzamento com uma fêmea duplo recessiva, serão produzidas somente duas classes fenotípicas correspondentes aos fenótipos parentais, com 50% de freqüência para cada uma. Não há recombinação nos machos de drosófila.

A interpretação dada para estes fatos é a de que ambos os genes bw e arc se localizam próximos um do outro no mesmo cromossomo e, desta maneira, tendem a ser herdados conjuntamente (não segregam independentemente) e são, por isso, chamados de genes ligados (ou em linkage). Desta forma, no macho do segundo cruzamento, o cromossomo com os genes bw+ e arc+ foi para um gameta e outro cromossomo, com os genes bw e arc foi para outro gameta, não havendo a formação de um gameta recombinante bw+arc  ou bw arc+. Isto explicaria o observado no segundo cruzamento, mas o caso da fêmea F1 do primeiro cruzamento em que foram produzidas as quatro classes fenotípicas seria explicado pelas existência, na meiose, de um rearranjo cromossômico no progenitor heterozigoto, chamado crossing-over.

FREQÜÊNCIA MÁXIMA DE RECOMBINAÇÃO

Pelos eventos descritos acima e utilizando os genes bw e arc como exemplo, concluímos que, quando há uma permuta (crossing-over),  a célula germinativa que passa pela meiose vai produzir, no final, quatro tipos de gametas, na proporção 1:1:1:1. Se não houver recombinação, serão produzidos apenas dois tipos. Conseqüentemente, podemos calcular a freqüência máxima de recombinantes entre dois loci quaisquer: se todas as células germinativas sofrerem permuta entre os dois loci seriam produzidos quatro tipos de gametas com a mesma freqüência de 25% cada um e a soma das freqüências dos recombinantes seria de 50%, ou seja, a freqüência máxima de recombinação entre dois loci é de 50%.

MAPA GENÉTICO

Como visto anteriormente, foi MORGAN quem descreveu a ligação entre dois genes em drosófila, mas foi STURTEVANT, em 1911, quem propôs que a freqüência de recombinantes entre dois genes poderia ser considerada  uma medida de distância entre dois loci: 1% de recombinantes (isto é, q = 0,01) é igual a uma unidade de distância, denominada centiMorgan (cM). No caso citado anteriormente da cor dos olhos e o tipo de asa em drosófila, a distância entre os dois genes seria 5,2 cM. o que representa a soma das freqüências dos dois recombinantes (2,6% cada um).

Quadro 5. Exemplo hipotético de freqüências fenotípicas observadas entre os descendentes de um cruzamento teste em relação a três caracteres.
FENÓTIPOS DOS  DESCENDENTES	TOTAL DE  DESCENDENTES	NÚMERO DE RECOMBINANTES A-B  B-C  A-C
ABC	261	-	-	-
abc	277	-	-	-
Abc	173	173	-	173
aBc	182	182	-	182
ABc	44	-	44	44
abC	51	-	51	51
AbC	5	5	5	-
aBc	7	7	7	-
TOTAIS	1000	367	107	450

 A análise acima descrita pode ser extendida para o caso em que se considera 3 caracteres e não apenas dois.Neste cruzamento, o macho é triplo homozigoto recessivo abc/abc e a fêmea é triplo heterozigota resultante de um acasalamento entre triplo homozigoto dominante ABC/ABC e triplo recessivo abc/abc. Suponhamos que o casal acima tenha produzindo 1000 descendentes em oito classes fenotípicas como mostra o Quadro 5.

Deve-se considerar apenas dois genes de cada vez. Houve 367 recombinantes entre os genes A e B, em uma progênie de l000. A freqüência de recombinantes é então calculada como sendo 36,7% e a distância entre A e B é considerada igual a 36,7 cM; entre B e C é calculada em 10,7% e a distância entre dois genes é considerada igual a 10,7 cM. Aplicando o mesmo raciocínio em relação aos genes A e C a distância entre eles é estimada em 45,0 cM (esta é uma estimativa errada, mas isso será visto mais adiante).

A partir destes dados, podemos construir o chamado mapa genético. Sabemos que A e B são separados por 36,7 cM, mas não sabemos se B fica à direita ou à esquerda de A; no momento, vamos supor que B fica à direita de A. Também sabemos que C fica 10,7 cM distante de B. Neste caso, podemos estar certos de que C está à direita de B uma vez que a distância de A e C foi calculada em 45 unidades. O mapa genético para estes três loci pode ser assim representado:

Entretanto, há uma discrepância entre as medidas: a distância de A a C (45,0) calculada pela freqüência de recombinantes entre esses genes é menor do que a soma das distância A-B e B-C, (36,6 + 10,7 = 47,4). Esta discrepância não é acidental: é devida à ocorrência de dupla recombinação entre A e C, isto é, ocorreu uma permuta entre os loci A e B e, ao mesmo tempo, uma quebra entre os loci B e C, seguida de outra troca. Esta dupla troca recoloca os genes A e C na associação parental. O efeito resultante da dupla recombinação entre dois genes quaisquer é fazer com que pareçam mais próximos um do outro do que realmente estão.

Na construção de mapas genéticos, é sempre preferível considerar a soma das distância curtas como a melhor estimativa da distância entre genes largamente separados. No exemplo dado, a dupla recombinação faz os genes A e C parecerem mais próximos um do outro. As duas últimas classes fenotípicas (AbC e aBc com freqüências de 0,5% e 0,7%, respectivamente) são resultantes de dupla recombinação entre A e C; portanto, deveriam ser considerados duplamente na terceira coluna com freqüência de 1% e 1,4%, respectivamente. Isto resultaria no cálculo exato da distância entre A e C que seria igual à 47,4 unidades. Esta distância é exatamente igual à distância no mapa, obtida pela adição das freqüências observadas entre A e B e entre B e C. Em conclusão:

Quanto mais próximos os genes estão entre si, menor é a chance de permuta entre eles e, conseqüentemente, menor será a freqüência de recombinação. Portanto, o grau de ligação entre dois genes pode ser representado pela proporção de descendentes recombinantes.

INTERFERÊNCIA

A relação entre a permuta simples e a dupla pode ser considerada como um problema de probabilidade. Se considerarmos cada permuta como ocorrendo independentemente uma da outra, a probabilidade de que ocorra uma permuta dupla é o produto das freqüências das permutas simples. No caso acima discutido, a chance de uma permuta dupla é 3,9% (isto é, 0,367 x 0,107). Entretanto, o exame dos dados mostrou que há apenas 1,2% de duplo recombinantes. Isso indica que a ocorrência de uma permuta inibe a ocorrência de outra em região próxima, diminuindo a freqüência de permutas duplas para aquela região do cromossomo. Há também um tipo oposto de interferência: no fungo Aspergillus, em bacteriófagos, em Neurospora, algumas bactérias, etc. há regiões pequenas regiões cromossômicas nas quais a ocorrência de permutações duplas têm freqüências muito maiores que as esperadas.

COMPRIMENTO TOTAL

Se considerarmos todos os loci de um dado cromossomo e somarmos as distâncias entre eles, obteremos o comprimento total daquele cromossomo e, é óbvio, se somarmos os comprimentos de cada cromossomo, teremos o comprimento total do mapa genético.

É claro que o "tamanho" assim calculado do cromossomo poderá ser maior do que 50 unidades; entretanto se aquele cromossomo apresentar invariavelmente um único quiasma na meiose, o seu "comprimento genético" será de, no máximo, 50 unidades, mesmo que somemos todas as distâncias entre todos os loci daquele cromossomo. Se um cromossomo apresenta sempre dois quiasmas, o comprimento será de 100 unidades e assim por diante. Deste modo, temos duas maneiras diferentes de calcular o "comprimento genético total" de uma espécie: uma delas é pela soma das distância entre todos os loci conhecidos e a outra pela contagem do número total de quiasmas por célula. O mapa genético dos dez cromossomos do milho indica um comprimento total de cerca de ll00 unidades e a freqüência de quiasmas em células em meiose é de aproximadamente 27 o que indica um comprimento de l350 unidades.

A discrepância não é surpreendente e está na direção certa. Na espécie, humana, com 23 pares de cromossomos, a freqüência total de quiasmas parece ser cerca de 55 o que sugere um comprimento total de mapa de aproximadamente 2750 cM.

LIGAÇÃO GENÉTICA NA ESPÉCIE HUMANA

(tradução parcial do cap.6 de Methodology in Medical Genetics, de A.E.H.Emery,1986) 

Nos anos recentes , uma grande variedade de técnicas de laboratório forneceu  grande quantidade de informação sobre a localização gênica  no homem (Francke, 1983).  Entretanto, a análise de heredogramas sempre será de utilidade, particularmente na localização dos genes que determinam características que não se expressam em células em cultura e para medir a distância entre os loci.

Muito já foi escrito sobre a análise de heredogramas em estudos de ligação genética e exposições detalhadas podem ser encontradas em Edwards (1971), Renwick (1971) e Smith (1968). Um introdução ao assunto, particularmente fácil de ser lida pode ser encontrada em Blood Groups in Man (Race & Sanger, 1975).

O método adotado para a determinação da ligação é a estimativa por máxima verosimilhança da fração de recombinantes (usualmente referida como q) baseada na probabilidade relativa (Pr) de que ocorra a família sob estudo. Este valor é obtido calculando-se a probabilidade de se obter as várias combinações possíveis do caráter em questão, assumindo-se que não haja ligação (q = 0,5) e comparando-se com os valores obtidos variando-se o valor desde q de 0,00 até 0,50, isto é:

PR = P(família, dado q = 0 até 0,5)/ P(f amília, dado q = 0,5)

Por conveniência, PR  é freqüentemente expresso como seu logaritmo. O logaritmo decimal (log 10) da probabilidade relativa é chamado log of the odds  ou lod score (Morton, 1955). A estimativa de q por máxima verosimilhança  pode ser obtida colocando-se em um gráfico a soma dos lod scores (ou as probabilidades relativas) para todas as famílias estudadas contra vários valores de q (de 0,00 a 0,50): é o valor de q correspondente ao pico da curva. Os loci  localizados no mesmo cromossomo são chamados sintênicos e os loci  sintênicos que exibem uma fração de recombinantes menor do que 50% (q < 0,50) são ditos ligados.

Ligação autossômica.

Famílias com três gerações.

Fase de ligação é uma expressão que se refere ao fato de estarem os genes no mesmo cromossomo (fase de acoplamento) ou em homólogos diferentes (fase de repulsão). Em famílias de três gerações, a fase da ligação nos indivíduos da segunda geração pode ser óbvia pela simples inspeção do heredograma. Assim, na família da Figura 1, onde os símbolos cheios representam distrofia miotônica (uma doença dominante) e os alelos do sistema secretor são representados por Se (dominante e determina o caráter secretor, isto é, determina o aparecimento das substâncias ABH nas secreções)  e se (recessivo e determinante do caráter não secretor), pode-se constatar que II1 deve ser heterozigoto para ambos os loci e que tem os genes para distrofia miotônica e o caráter secretor em acoplamento. Portanto, na terceira geração, os indivíduos III2-6 são todos não recombinantes, enquanto que III1 é recombinante. 

Figura 1. Família na qual segregam a distrofia miotônica (dominante) e o caráter secretor.

Nesta situação, a fração de recombinantes  é 1/6 ou 0,17. De fato, o estudo de um grande número de famílias nas quais puderam ser estudados o caráter secretor e a distrofia miotônica revelou um valor de q  próximo a 0,07.

Famílias com duas gerações.

Quando estão disponíveis informações de apenas duas gerações de uma família, a medida da ligação é um pouco mais complexa e exige alguns recursos matemáticos para sua determinação.  Se G e g são alelos do locus principal (no caso, a doença) e T e t são alelos do locus teste (marcador genético), então se um indivíduo com o genótipo GT/gt (isto é, em acoplamento) pode produzir quatro tipos possíveis de gameta: dois não recombinantes (GT e gt) e dois recombinantes (Gt e gT). Se a freqüência de recombinantes é q, tem-se que:

freqüência de gametas não recombinantes = 1 - q

portanto, freqüência de gametas GT ou gt = (1 - q)/2

e a freqüência

de gametas recombinantes será = q

o que implica na freqüência de gametas Gt ou gT = q/2

Se estes dois loci não estiverem no mesmo cromossomo (isto é, não forem sintênicos) ou se estiverem no mesmo cromossomo mas muito distantes entre si (q >0,5), haverá igual número dos quatro tipos de gametas.

Consideremos agora uma família na qual o grupo sangüíneo Lutheran e o caráter secretor estejam segregando. Os alelos Lutheran são Lua e Lub, sendo o primeiro dominante (veja Figura 2). 

Figura 2. Segregação do caráter secretor e grupo sangüíneo Lutheran. 

Neste heredograma, a mãe deve ter o genótipo  Lub se/Lubse e o pai deve ser Lua Se/Lubse  ou Lua se/LubSe; se o pai tiver o primeiro genótipo, as quatro primeiras crianças serão consideradas não recombinantes (Figura.3).

Neste caso, tem-se as seguintes probabilidades:

3 crianças Lub se/Lubse  =  ((1-q)/2)3

1 criança  Lub se/LuaSe  =  (1-q)/2

1 criança  Lub se/LubSe   =  q/2

Portanto, a probabilidade de que uma família deste tipo exista, dado que o pai tem o genótipo Lua Se/Lubse , será de:

=   ((1-q)/2)3  (1-q)/2  q/2

=  q(1-q)4/32 

Figura 3. Genótipos da família da família da fig.2, considerando um dos genótipos possiveis para o pai. 

Consideremos agora a outra possibilidade, isto é, quando o pai tem o genótipo Luase/LubSe. Aqui, as primeiras quatro crianças são todas recombinantes e a última, não recombinante (Fig.4). 

Figura 4. Genótipos da família da família da fig.2, considerando o outro genótipo possível para o pai.

Neste caso,  tem-se as seguintes probabilidades:

3 crianças Lubse/Lubse  =  (q/2)3

1 criança  Lubse/LuaSe  =  q/2

1 criança  Lubse/LubSe  =  (1-q)/2

Portanto, a probabilidade de que esta família exista, dado que o pai tem o genótipo Lua se/LubSe é:

(q/2)3  q/2  (1-q)/2  =  q4 (1-q)/32

Neste ponto, o que se tem de decidir é qual a probabilidade de se obter os fenótipos observados nas crianças sob duas condições diferentes: os genes do pai estão em fase de acoplamento ou repulsão. Desde que o acoplamento e a repulsão são igualmente prováveis, a probabilidade de que exista uma dada família como esta é dada pela média aritmética entre os dois valores obtidos considerando-se, primeiro, o acoplamento e, depois, a repulsão: 

Pq = 1/2 {[ (1-q)4 q /32]+[ q 4(1-q)/32]}

Se for assumido q = 0,2, tem-se:

P0,2  =  0,001 300

E se for assumido q = 0,5:

P0,5 = 0,000 976

Portanto, a razão entre as probabilidades (PR), quando q = 0,2, será:

                                  = 0,001 300/0,000 976

                                  = 1,3320

Este procedimento é então repetido variando-se q de 0,0 a 0,5 , obtendo-se os valores da tabela abaixo:

Grupo sangüíneo Lutheran / caráter secretor:probabilidades relativas e lod scores para diferentes valores de q.
Freqüências de Recombinantes  q	0,0	0,1	0,2	0,3	0,4	0,5
Probabilidade Relativa  lod score	- ...	0,022	0,124	0,095	0,031	0,00

 As probabilidades relativas e respectivas frações de recombinantes são colocadas em gráfico e, desse modo, é obtida a estimativa de q por máxima verosimilhança (Figura 5). No exemplo dado, a estimativa de q por este método aponta um valor aproximado de 0,21. De fato, o estudo de um grande número de famílias nas quais puderam ser estudados o grupo sangüíneo Lutheran e o caráter secretor indicou que o valor de q é de aproximadamente 0,15. 

Figura 5. Probabilidades relativas de ligação para diversos valores da fração de recombinantes.

Fração de recombinação e distância de mapa.

A distância relativa entre diferentes loci em qualquer cromossomo é dependente da freqüência de ocorrência de crossing-over entre eles: 1% de crossing-over (isto é, q = 0,01) é igual a uma unidade de distância ou centiMorgan (cM). A relação entre a fração de recombinação e a distância física entre os genes no cromossomo não é linear: quanto mais distantes um do outro, maior será discrepância entre as duas medidas, uma vez que ocorrerá uma maior quantidade de cross-overs duplos que serão computados como não recombinantes.  Diversas fórmulas foram descritas (p.ex. Haldane, 1919; Kosambi, 1944; Carter & Falconer, 1951) com o objetivo de transformar as frações de recombinação em unidades de distância.

Devido a quantidade limitada dos dados comumente fornecidos pelos heredogramas humanos, é pouco provável que possa ser detectada ligação entre dois genes se q for muito maior do que 0,20.  Considerando-se que a relação entre a distância, em unidades de mapa, e a fração de recombinação  é praticamente  linear se q for menor do 0,20, do ponto de vista prático,  as freqüências de recombinantes podem ser convertidas diretamente em distância de mapa sem perda significativa de precisão.

Por razões que ainda não estão claras, a recombinação é freqüentemente maior em mulheres do que em homens. Portanto, ao se estudar ligação genética, as famílias deveriam ser classificadas, se possível, em dois grupos: um deles no qual a mãe é o genitor duplo heterozigoto e o outro, no qual é o pai. Além disso, as freqüências de recombinação assim obtidas deveriam ser consideradas para cada sexo separadamente.

LEI DA HERANÇA INDEPENDENTE 

Lei da Herança Independente: A herança de um caráter é independente da herança de outro caráter.

A partir de então os descobrimentos se sucederam em cadeia até chegar ao estado atual das coisas.

Em 1902, Sutton, relacionou o comportamento dos cromossomas com o que Mendel chamava fatores hereditários.

O primeiro prêmio Nobel sobre genética, Thomas Hunt Morgan, estabeleceu a teoria cromossômica, a herança.

Provou que: os gens, antes chamados fatores mendelianos, se localizam nos cromossomas.

Os gens programam a informação do que o indivíduo pode chegar a ser, porém o meio ambiente determina o que o indivíduo chegará a ser e o homem tem capacidade para selecionar o que o convém.

Assim sendo: no desenvolvimento de um animal há que se ter em conta três elementos: a herança, a seleção e o meio ambiente.

A contaminação ambiental, as deficiências na alimentação, o excesso de umidade o exercício inadequado ou a falta dele, os agentes infecciosos..., impedem que a informação genética de um indivíduo se manifeste tal como estava codificada em seus gens.

Conclusão: Completamente tudo no cão, todos e cada um dos caracteres, são herdados.